Immunfixierung
Die Immunfixierung ist eine immunologische Technik, um die Typisierung von monoklonalem Immunglobulin im Serum oder Urin eines Patienten hervorzuheben und zu klären . Es neigt derzeit dazu, die Immunelektrophorese zu verdrängen . Es ist von großem Interesse für die Diagnose und Beurteilung bestimmter Hämopathien wie Myelom.
Prinzip
Es handelt sich um eine Methode zum Nachweis durch Ausfällung, dh wenn das lösliche Immunglobulin mit dem entsprechenden Antikörper in Kontakt gebracht wird, tritt ein Phänomen der Ausfällung auf, das mit bloßem Auge oder mit einem Gerät sichtbar ist.
Die Immunfixierung ermöglicht es, monoklonale Immunglobuline in einem Gemisch entsprechend ihrer elektrophoretischen Mobilität zu identifizieren. Um diese Identifizierung zu ermöglichen, werden für diese Immunglobuline spezifische Antikörper verwendet. Die Immunfixierung ermöglicht insbesondere den Nachweis von monoklonalen Immunglobulinen, die bei Krankheiten wie Myelom oder Waldenström-Krankheit vorhanden sind .
Technisch
Es besteht aus der Ablagerung von Serum (oder Urin, das zuvor konzentriert worden sein wird) auf einem Gel. Nach Anlegen eines elektrischen Stroms, der die Trennung der Proteine nach ihrer Größe ermöglicht, werden spezifische Antikörper für jede Art von Immunglobulin auf dem Gel abgelagert. Auf dem Gel erscheinen somit mehr oder weniger schmale Banden auf der Ebene, auf der sich die verschiedenen Immunglobuline befinden.
Die Immunfixierung erfolgt wie die Immunelektrophorese in zwei Stufen:
- Der erste Schritt ist für beide Techniken identisch. Es besteht darin, die im Serum oder im Urin enthaltenen Immunglobuline auf einem Gel abzuscheiden und diese Immunglobuline dann nach ihrer elektrophoretischen Mobilität zu trennen, indem sie unter der Wirkung eines elektrischen Feldes wandern. Diese Migration hängt von der Masse und der Ladung des Antigens ab. Sobald die Immunglobuline getrennt wurden, können wir mit dem nächsten Schritt fortfahren.
- Der zweite Schritt hängt von der verwendeten Technik ab. Für die Immunfixierung muss das getestete Serum mehrmals migriert werden. Hierzu werden die Anti-Immunglobuline nicht wie bei der Elektrophorese in einem Kanal abgelagert, sondern auf jeder Migrationsspur einzeln zugegeben. Das Vorhandensein eines monoklonalen Immunglobulins führt nach Färbung der ausgefällten Komplexe zum Auftreten einer schmalen Bande. Wenn es sich beispielsweise um ein Lambda-IgG handelt, wird eine schmale Bande sowohl auf der Spur, auf der das Anti-G abgelagert wurde, als auch auf der Spur, auf der das Anti-Lambda abgelagert wurde, beobachtet.
Leistungen
Die Immunfixierung verdrängt tendenziell die Immunelektrophorese, weil sie den Vorteil hat, dass sie:
- schneller (Reaktionszeit in weniger als drei Stunden);
- etwas empfindlicher, so dass die Immunfixierung ein Ig aufdecken kann, das durch Elektrophorese unbemerkt geblieben ist, insbesondere wenn es in kleinen Mengen (weniger als 1 Gramm / Liter) vorhanden ist;
- teilweise automatisierbar und daher von einer größeren Anzahl von Laboratorien erreichbar;
- leichter zu lesen und zu interpretieren.
Nachteile
Die Hauptnachteile der Immunfixierung sind:
- die Erforschung anderer Serumproteine als Immunglobuline vollständig ignorieren;
- teurer sein als Immunelektrophorese.
Externe Links