DsRed
| DsRed | |
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| Identifizierung | |
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| N o CAS | |
| Optische Eigenschaften | |
| Fluoreszenz | Anregung 558 nm Emission 583 nm |
| Einheiten von SI und STP, sofern nicht anders angegeben. | |
Die DsRed ist ein Protein Tetramer die Eigenschaft Emittieren eines mit Fluoreszenzfarbe rot . Dieses aus einer Koralle ( Discosoma ) stammende Protein ist von Natur aus fluoreszierend. Sein Gen kann in vitro mit dem Gen für ein Protein fusioniert werden , das man untersuchen möchte. Das rekombinante Gen wird dann wieder in Zellen oder einen Embryo eingeführt , der dann das Fusionsprotein synthetisiert, das dann fluoresziert. Wir können es dann mit einem Fluoreszenzmikroskop beobachten ., beispielsweise. Diese Methode ermöglicht es, Proteine in ihrer natürlichen Umgebung zu untersuchen: der lebenden Zelle.
Die DsRed, maximale Anregung bei 558 nm (grünes Licht). Die maximale Emissionswellenlänge beträgt 583 nm . Einer seiner lähmenden Mängel ist die langsame Reifung des Proteins, da eine der Zwischenformen eine grüne Fluoreszenz aufweist, die der des grün fluoreszierenden Proteins (GFP) ähnlich ist .
Es gibt jetzt verschiedene Varianten von DsRed, die durch gentechnische Modifikation erhalten wurden. Diese Mutationsschritte haben es ermöglicht, dimere oder monomere Formen zu erhalten, die Helligkeit zu erhöhen oder den von den Anregungs- und Emissionsspektren betroffenen Wellenlängenbereich zu ändern.
Durch Mutagenese erhaltene Varianten:
- dimer2: dimere Variante
- mRFP1: monomere Variante, langsame Reifung
- dTomato: dimere Variante
- tdTomato: tetramere Variante
- mOrange: monomere Variante, orange Fluoreszenz
- mBanana: monomere Variante, orange Fluoreszenz
- mHoneydew: monomere Variante, grün-orange Fluoreszenz
- mStrawberry: monomere Variante, rote Fluoreszenz zwischen DsRed und mRFP.
- mCherry: Monomervariante, Fluoreszenz ähnlich wie mRFP mit schnellerer Reifung und besserer Stabilität.
Literaturverzeichnis
- Shaner et al. , “Verbesserte monomere rot, orange und gelb fluoreszierende Proteine, die von Discosoma sp. rot fluoreszierendes Protein “, Nature Biotechnology , vol. 22, pp. 1567 bis 1572, 2004.
Anmerkungen und Referenzen
- (in) Campbell et al. , " A monomeren fluoreszierendes Protein rot " , Proc Natl Acad Sci US A. , n o 99,11. Juni 2002, p. 7877-7882 ( online lesen )