Das HAT-Medium für Hypoxanthin- Aminopterin Thymidin ist ein für Säugetierzellen selektives Kulturmedium , das auf Aminopterin basiert, einem Arzneimittel, das als Inhibitor des Folsäurestoffwechsels wirkt, indem es die Dihydrofolatreduktase und das Hypoxanthin und Thymidin hemmt, die Zwischenprodukte bei der Purinsynthese sind Basen der DNA.
HAT-Medium wird häufig zur Herstellung monoklonaler Antikörper verwendet . Labortiere (zB Mäuse ) werden zunächst einem Antigen ausgesetzt, aus dem der entsprechende Antikörper isoliert werden soll. Sobald die Splenozyten aus dem Säugetier isoliert sind, werden die B-Lymphozyten mit HGPRT- negativen Myelomzellen fusioniert , die mit Polyethylenglykol oder Sendai-Virus immortalisiert sind . Die fusionierten Zellen werden dann in HAT-Medium inkubiert. Aminopterin blockiert die De-novo- Synthese von Nukleotiden ( endogener Weg ), was zur Folge hat, dass die nicht fusionierten Myelomzellen abgetötet werden. Die nicht fusionierten B-Lymphozyten, die eine relativ kurze Lebensdauer haben, sterben ebenfalls ab. Somit entwickeln sich nur B-Lymphozyten-Myelom-Zell- Hybridome . In der Tat ermöglicht HGRPT diesen Zellen, diese Nukleotide exogen zu synthetisieren . Das Inkubationsmedium wird dann verdünnt, um nur eine Zelle zu gewinnen, die den ausgewählten Antikörper produziert.
Dies hat die Funktion, spezifische monoklonale Antikörper zu erzeugen.