Der Mannitolsalzagar oder MSA (englischer Mannitolsalzagar ) ist ein Kulturmedium, das selektiv und differenziell in der Mikrobiologie zur Kultivierung von halophilen und halotoleranten Bakterien verwendet wird . Es wurde 1945 von GH Chapman entwickelt. Dank seines farbigen Indikators, der den Verbrauch von Mannit erfasst , eignet es sich zur Erforschung von Staphylokokken von medizinischem Interesse und insbesondere des Erregers Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) in allen Arten von klinischen und Umweltproben.
Die Nährstoffbasis besteht aus Pepton , Rindfleischextrakt und D-Mannit .
Die Selektivität des Mediums beruht auf seinem hohen Natriumchloridgehalt : Mit 7,5% oder 75 g / l erhält es einen ausgeprägten hypertonischen Charakter. Dort können sich nur halophile oder offen gesagt halotolerante Organismen entwickeln, wodurch eine große Anzahl von Kontaminanten eliminiert wird (die meisten Enterokokken , Streptokokken und gramnegativen Bakterien, einschließlich Enterobacteriaceae ).
Das Phenolrot ist eine rote Farbe des pH-Indikators im anfänglichen mittleren pH-Bereich (7,4 ± 0,2). Es ermöglicht das Ablesen des Mannit-Charakters: Die Bakterien, die dieses Monosaccharid metabolisieren können, bauen es in saure Nebenprodukte ab, die sich im Medium ansammeln und den Indikator gelb werden lassen.
Verdächtige Kolonien von Staphylococcus aureus sind solche, die den Mannitcharakter aufweisen („Mannit +“ - Kolonien), dh sie färben die Umgebung gelb.
Selbst wenn dieses Zeichen einen Orientierungswert haben kann, können wir nur das Vorhandensein von S. aureus vermuten . Das Wachstum einer Kolonie, die das Chapman-Medium gelb färbt, zeigt nur, dass es sich um einen halotoleranten Mikroorganismus mit 7,5% Natriumchlorid handelt, der Mannit durch Bildung saurer Nebenprodukte abbauen kann. Weitere Tests sind erforderlich, um die Identifizierung zu bestätigen oder nicht.
Für 1000 ml Medium:
Stellen Sie den pH-Wert bei 25 ° C (nach dem Autoklavieren) auf 7,4 ± 0,2 ein.
Nach Angaben der Hersteller können die 10 g / l eines Peptons durch eine Kombination aus 5 g / l Pankreaspepton Casein und 5 g / l Peeps Pepton Fleisch ersetzt werden.
Kein Inhaltsstoff ist wärmeempfindlich, es reicht aus, ihn heiß in dem entsprechenden Volumen destilliertem Wasser aufzulösen und in einem Autoklaven (15 Minuten bei 121 ° C) zu sterilisieren. Die Mischung wird dann in sterilen Behältern verteilt.